新材料及其应用

本发明公开了一种定量总脂含量的分光光度法及应用，依据脂质对酞菁聚集体的解聚机制，以四仲辛氧基镍酞菁为比色材料，石油醚为溶剂，准确定量总脂含量。分三步：(1)制作标准曲线。配制特定浓度酞菁溶液，以压榨花生油为标准脂质，无油样溶液为参照，在675nm分析，拟合吸光度和花生油浓度之间的坐标点，得线性方程。(2)脂质萃取。称量待分析样品，经萃取、蒸除溶剂和称量，回收脂质。(3)总脂定量。取酞菁溶液2.5mL，与0.5mL回收脂样混合，以无脂样溶液为参照，在特征波长下分析，去掉同体积脂样的吸收，代入线性方程，计算脂浓度，及相应的脂质量和总脂含量。与传统的萃取/称重法相比，该法更准确，能避免回收样中残留溶剂的影响。

传统的脂质分析方法是有机溶剂萃取称重的方法，也就是称量生物样品后，用低沸点的溶剂进行充分萃取脂质，然后蒸除溶剂，称量回收脂质的质量，计算得出脂质含量。实际上，这种分析方法分析的是总脂的含量。这种对于总脂的分析，一般即可满足对分析对象进行评估的要求。尽管如此，总脂含量的分析技术也在一直受到重视并得以改进，一方面是筛选有利于萃取脂质的溶剂或者使用按比例混合的溶剂，以提高脂质的萃取效率，减少分析的误差。另一方面是使用新的定量方法如色谱、光谱和其他特殊方法代替简单的称重方法，以避免称重方法中残存溶剂的干扰。时至今日，还没有找到可有效代替称重法的可行的方法，因为所谓的新方法在精确度、灵敏度和应用范围上有较大的局限性，不能用于通常的脂质分析，还需要进一步的深入研究。在定量方法中，有一种相对最为简单和方便的方法，即紫外可见分光光度法，这种光谱技术简易、稳定且使用费用低廉，再有，分光光度计在一般的实验室中都有这种仪器。虽然分光光度法定量总脂的研究已经有所开展，但是定量结果的准确性受到比色试剂的限制，比色试剂通常不能彻底地与脂质发生反应，造成比色结果不够准确。以此，至今传统的分光光度技术用于定量总脂含量尚不成熟，最大的局限性就是缺乏可用的比色试剂。假如有理想的比色试剂，能够对脂质的存在灵敏地做出相应，那么，就可能相应地发展为一种更准确地定量总脂含量的新方法。

1、分析结果准确。这种分光光度法，使用的比色材料为酞菁材料，其在分析溶剂中对脂质的溶入响应灵敏，并在<1:5(V:V，脂样:酞菁溶液)范围内，呈线性关系，R2>0.99。根据算式(1)计算的结果，一般小于算式(2)计算的结果，可有效避免溶剂的干扰，更接近真实结果。[0013]2、克服了比色材料的瓶颈。分光光度法简便易行，在脂质总量分析中的瓶颈为理想的比色材料难以找到，因此至今没有用分光光度进行定量总脂含量。根据酞菁材料的溶解性和在溶剂中的解聚动力学，选用适宜的烷氧基取代金属酞菁和相应的溶剂，可以用脂质的浓度调控其聚集体的解聚平衡，其特征吸收相应做出灵敏的响应。进而根据特征吸收与脂质浓度之间的线性关系定量总脂。其中，理想的酞菁材料是分析方法可行的关键。