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高效表达的串联猪α、γ干扰素基因及其表达蛋白的用途

  • 发布时间: 2024-12-03
预算 双方协商
基本信息
成果方:山东省农业科学院畜牧兽医研究所
合作方式:技术转让
成果类型:发明专利,
行业领域
生物、医药和医疗器械技术
成果描述

本发明涉及基因表达领域,高效表达的串联猪α、γ干扰素基因核苷酸序列见序列2。序列2的基因克隆至真核表达载体获得的重组质粒。串联猪α、γ干扰素基因的合成方法:将Rabbitβ-GlobinIntronII、pCMV即刻早期启动子、T7启动子插入pVAX1©、得到pMVAX1©,将融合蛋白基因pIFN-α/γ插入pMVAX1©,得pMVAX1©-pIFN-α/γ。其表达蛋白在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征的药物中的应用。突破了通过pVAX1©表达pIFN-α、pIFN-γ时表达量低活性差的局限性,活性达1×***,能明显抑制高致病性PRRSV增殖,减少猪场的经济损失。

应用范围
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS),俗称"猪蓝耳病",由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)引起,病毒感染后可以导致母猪流产、返情、产死胎或弱仔、仔猪死亡及各种年龄的猪不同程度的呼吸道症状,并且能破坏猪的免疫系统,引起混合感染或继发感染。我国于1995年底爆发此病,并迅速蔓延到全国多个省份。在许多规模化猪场,PRRS阳性率很高,有的可达80%以上。自2006年以来,我国部分地区猪场发生了由PRRSV变异株导致的高致病性蓝耳病。该病在临床上以发病猪高热、呼吸困难、皮肤发红为主要特征,具有更高的发病率和死亡率,给我国的养猪业造成了极为严重的经济损失。


前景分析
本发明的有益效果是:
(1)用改造过的真核质粒pVAX1©即pMVAX1©表达pIFN-α/γ串联融合蛋白,突破©了通过pVAX1 载体表达pIFN-α、pIFN-γ过程中遇到的表达量较低和活性较差的局限性;
(2)体外抗病毒试验证明,本发明构建的pIFN-α/γ表达活性很高,转染©1µg pMVAX1-pIFN-α/γ至HEK-293A细胞的裂解物,用VSV检测IFN的活性单位高达8.01×10 U/0.1mL,当活性在100U以上时能够明显抑制高致病性PRRSV在Marc-145细胞上的增殖,专用于对高致病性PRRSV等病毒性疾病的预防治疗及减少猪场的经济损失。


联系方式

  • 联系人:

    齐静

  • 联系电话:

    15600210361

  • 通讯地址:

    山东省济南市工业北路202号

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