生物、医药和医疗器械技术

本发明涉及疫苗佐剂技术领域，特别涉及一种复方油佐剂，由白油、油醇聚氧乙烯醚和聚氧乙烯醚硬脂酸酯三种成分组成。白油占80%-95%，油醇聚氧乙烯醚占1%-10%，聚氧乙烯醚硬脂酸酯占1%-10%。油醇聚氧乙烯醚分子量为400-600，聚氧乙烯醚硬脂酸酯分子量为400-600。分别称取处方量的白油、油醇聚氧乙烯醚和聚氧乙烯醚硬脂酸酯，均匀混合而成。复方油佐剂在制备动物疫苗中的应用。本发明成功解决了W/O/W型乳剂疫苗制备困难的难题，所制备的乳剂疫苗既便于注射又具有良好的免疫原性，而且稳定性比ISA206所制各的W/O/W型乳剂疫苗更好。

油性佐剂疫苗是已公知的可有效强化免疫性的疫苗，是目前国内外疫苗市场上产品最多的类型之一，油乳剂疫苗有三种类型：油包水(W/O)型、水包油(O/W)型和水包油包水（W/O/W）型。

油包水(W/O)型应用最普遍，是分三步骤，首先通过将司本-85加入白油中、吐温-80加入抗原水溶液中，再将二者混合物进行乳化制备而成。其显著优点是可获得高水平持久的免疫增强效果。缺点是较粘稠，注射较困难。同时由于疫苗中白油含量相对较高，常常导致严重的接种副反应、形成无菌性化脓损害和接种部位周围的肉芽肿，可产生外部可见的浮肿、肿胀、硬结和坏死。而且怀疑在接种部位有留存的可能，这便妨碍了疫苗的使用。水包油(O/W)型是为减少乳剂中油含量建立此法，但未普遍应用。该剂型优点是粘度低，易于注射，缺点是免疫原性弱，仅诱导动物体内产生较弱的免疫应答，在人用疫苗应用方面已有商业化应用，如MF59佐剂用于流感疫苗的制作，但是在动物疫苗上尚未推广应用。

水包油包水（W/O/W）剂型兼具有W/O型和O/W型的优点，效果很好。常规的做法是先制备W/O型疫苗，再经第二次分散到水相中制备而成。目的是降低黏度，既便于注射又具有良好的免疫原性。但制备技术上难度较大，疫苗稳定性差，如能克服此缺点，它是最理想的乳剂疫苗。国内外公认的最好此类佐剂为ISA206（法国SEPPIC公司生产）。它通过自乳化技术，直接将ISA206与抗原水溶液混合、乳化，一步法即可制备出W/O/W型乳剂疫苗，解决了W/O/W型乳剂疫苗制备难的问题，而且具有一定的稳定性，在全球范围得到了广泛应用。其不足之处为所制备的W/O/W型乳剂疫苗稳定性还不太令人满意，而且价格昂贵。专利“一种自乳化疫苗佐剂及其制备方法”（ZL 200510037639.8）公布了一系列W/O/W型乳剂疫苗的制备方法，但是其配方复杂，田间试验时有副反应发生。而且稳定性不足12个月，不能满足生产实际需要，也未见其商品化使用。因此，建立稳定、简便、价廉的W/O/W型乳剂工艺具有极其重要的现实意义和市场价值。

本发明的有益效果：本发明应用自乳化原理，开发了一种新复方油佐剂，该复方油佐剂与抗原水溶液经过手摇、磁力搅拌或机械挤压乳化等乳化工艺均可制作成稳定的W/O/W型乳剂疫苗，成功解决了W/O/W型乳剂疫苗制备困难的难题，所制备的乳剂疫苗既便于注射又具有良好的免疫原性，而且稳定性比ISA206所制各的W/O/W型乳剂疫苗更好。