生物、医药和医疗器械技术

本发明公开了鸡传染性贫血和鸡细小病毒二重LAMP检测引物组，它们分别具有序列表SEQ. ID. No.1至SEQ. ID. No. 6的碱基序列。据此，通过优化反应体系和条件，发明人还研制了相应试剂盒并建立相应二重LAMP方法。该法只需要在63"C的水浴锅中恒温反应90分钟即可完成，能特异地检测鸡传染性贫血和鸡细小病毒，并且检测的灵敏度非常高，能检测到10个混合模板拷贝/μ1的鸡传染性贫血和鸡细小病毒DNA混合样品。

鸡传染性贫血和鸡细小在鸡群中普遍存在，均是危害雏鸡的病毒性疾病。鸡传染性贫血病毒(Chichen infectious anemia virus，CIAV)，可使雏鸡骨髓黄化、淋巴组织萎缩，进而导致雏鸡造血功能和免疫抑制障碍。鸡细小病毒(chicken parvovirus，ChPV)主要引起以腹泻、精神沉郁、体温调节障碍、生长迟缓、增加饲料消耗为特征的急性或慢性肠道性疾病、营养不良综合征、发育障碍与矮小综合征。近年来，北美、匈牙利、巴西和韩国等国家地区相继报道该病的暴发。

传统的检测方法，如二温式PCR，PCR和荧光PCR，需要使用昂贵的仪器和试剂，且操作繁琐，耗时耗力等。而环介导等温扩增技术(loop‑mediated  isothermal amplification，LAMP)是由Notomi等于2000年建立的一种新型核酸扩增技术，该技术具有操作简便、反应快速、成本低廉和结果可视化等优点。如今，LAMP法已经广泛应用于病原微生物检测。

通过优化反应体系和条件，发明人还研制了相应试剂盒并建立相应二重LAMP方法。该法只需要在63℃的水浴锅中恒温反应90分钟即可完成，能特异地检测鸡传染性贫血和鸡细小病毒，并且检测的灵敏度非常高，能检测到10个混合模板拷贝/μl的鸡传染性贫血和鸡细小病毒DNA混合样品。试验证实，本发明具有比常规检测方法更特异、更敏感的特点，且通过荧光基团的颜色检测阳性结果，有效抑制了假阳性结果，并且减少了气溶胶污染，具有较好的应用前景。