生物、医药和医疗器械技术

本专利建立了一种快速检测鉴别禽肺炎病毒的环介导等温扩增（LAMP）方法。在禽肺炎病毒F基因保守序列设计了六条特异的环介导等温扩增引物组（包括2条内引物FIP和BIP、2条外引物两条F3和B3、2条环引物），利用该引物组、扩增缓冲液进行等温扩增，可特异检出禽肺炎病毒，最低检出限为100fg/µL ，其敏感性为常规RT-PCR的100倍。

禽肺炎病毒（Avian pneumo virus,APV)是禽偏肺炎病毒属的成员，属于禽副黏病毒科。该病毒主要危害火鸡和不同品种的鸡，包括种鸡、商品肉鸡和鸡蛋，发病日龄一般在4—7周龄，5—6周龄为发病高峰，主要引起上呼吸道的症状，以喷嚏，眼结膜潮红，泪腺肿，头部出现皮下水肿，俗称肿头；产蛋鸡感染主要引起产蛋下降2%—40%，孵化率降低；随着病情的发展，还表现出神经症状；该病引起的发病率在1%—90%之间，引起鸡死亡率在1%—20%，在发病期间继发其它疾病的感染，会引起更大的死亡，造成对养禽业尤其是种禽的极大危害。

目前，检测禽肺炎病毒的方法有病毒鸡胚分离、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术（IFA）、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)、基因芯片(Gene chips)。传统的病毒鸡胚分离方法准确、简便，但耗时太长，通常需要两天到一周的时间；IFA、ELISA快速但需要特殊试剂；RT-PCR、RRT-PCR、Gene chips检测技术快速、灵敏，但都需要特殊仪器和技术人员，且成本较高，不适合在基层推广使用。

本发明针对禽肺炎病毒F基因保守序列设计了六条特异的LAMP引物组，利用该引物组进行LAMP检测可特异检出禽肺炎病毒，最低检出限为100fg/μL，其敏感性为常规RT-PCR的100倍。本发明具有检测快速且成本低，不需要昂贵的仪器并且操作方法更简单，适于临床快速检测。