生物、医药和医疗器械技术

鸭坦布苏病毒和禽流感病毒多重PCR检测试剂盒，可检测DTMUV和所有亚型AIV并能进行H9亚型AIV分型检测,具有操作简便、敏感性高、特异性强等优点。本发明用于H9亚型禽流感病毒感染造成的免疫力减低导致的鸭坦布苏病毒的混合感染的检测诊断,既可以节约时间的成本,又可以减少污染。

鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu Virus，DTMUV)最早发现于中国的福建、浙江、江苏等东部沿海主要蛋鸭养殖区，是一种新兴的致病性黄病毒。DTMUV感染鸭后可导致蛋鸭产蛋量严重下降，产蛋率可从90％下降至10％以内，甚至绝产；感染雏鸭后可导致雏鸭出现站立不稳，倒地不起等神经症状，进而导致雏鸭淘汰率升高，严重的甚至高达80％，因此给养鸭业带来了严重的经济损失。禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)属于正黏病毒科A型流感病毒属，AIV为单股负链RNA，由8个独立的RNA节段组成。AIV根据致病性的不同，可分为高致病性禽流感病毒(HPAIV)和低致病性禽流感病毒(LPAIV)。HPAIV(如H5亚型)通常可引起感染鸭群的突然死亡和大量死亡；H9亚型AIV虽属LPAIV，但它分布广泛，能造成鸭的免疫抑制并引发与其他鸭病的混合感染，产蛋鸭感染后也可造成产蛋量的明显下降，极大影响了蛋鸭的经济效益，因此它对养鸭业的危害也不可忽视。

上述疾病都是极大危害养鸭业经济效益的鸭病毒性传染病，目前，对这两类病毒传统的检测方法主要有病毒分离、血清学试验、琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验等，但这些方法存在耗时长、敏感性差、难标准化等局限性，尤其是当这两种病毒混合感染时，更增加了临床诊断的难度。因此，开发一种快速检测DTMUV和AIV且能同时进行H9亚型AIV分型检测的技术具有重要意义。

针对目前缺乏对DTMUV、所有亚型AIV和H9亚型AIV同时进行检测和诊断的有效可靠的技术，发明人结合多重PCR一管多检、高通量、低成本、高效率等优点，研究设计了三对特异性引物，据此建立了鸭坦布苏病毒和所有亚型禽流感病毒并能进行H9亚型AIV分型检测的多重PCR检测方法，并制备了相应的检测试剂盒。实验证明，应用本发明可检测DTMUV和所有亚型AIV并能进行H9亚型AIV分型检测，具有操作简便、敏感性高、特异性强等优点。本发明用于H9亚型禽流感病毒感染造成的免疫力减低导致的鸭坦布苏病毒的混合感染的检测诊断，既可以节约时间的成本，又可以减少污染。