生物、医药和医疗器械技术

建立快速特异检测H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条检测方法，用抗H7亚型禽流感病毒单克隆抗体标记胶体金制作金标垫，H7亚型禽流感病毒多克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体分别划膜作为检测线（T线）和质控线（C线），经过一系列的条件优化，制备H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条检测方法，并检验试纸条的特异性、敏感性、重复性和稳定性。通过对临床血清样品进行检测评价该试纸条的可靠和实用性。

自2002年以来，全球(荷兰、意大利、加拿大、美国以及英国等国家)报道的人感染H7亚型禽流感病毒(AIV H7)病例高达247人。根据中国疾控中心数据统计，2013年3月31日至2013年8月15日，中国上海、北京、江苏、浙江、安徽、福建江西、山东、河南、湖南等10个省份共报道了134例H7N9亚型禽流感病毒（AIVs）人感染病例，台湾确诊病例1人，其中45人死亡。H7亚型禽流感病毒不仅影响养禽业的健康发展，并且严重威胁人类的生命健康。为了有效地控制H7亚型禽流感病毒的传播，各国学者正致力于研发各种检测H7亚型禽流感病毒的方法。

目前检测AIV的主要方法有病毒分离鉴定、酶联免疫吸附(ELISA)、反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、核酸序列依赖性扩增（NASBA）、环介导等温扩增(LAMP)以及GeXP方法等。胶体金免疫层析分析(gold-immunochromatography assay，GICA)是近年发展起来的一种以胶体金为标记物，通过抗原抗体免疫学反应对样本中的生物大分子进行定性分析的免疫学分析技术。胶体金作为免疫标记物应用于免疫学分析始于1971年，随着1989首次以胶体金为标记物开发的艾滋病抗体渗滤检测试剂诞生以来，免疫胶体金快速检测技术在生命医学诊断各个领域中得到了广泛应用。目前尚未有H7亚型禽流感病毒快速检测的免疫胶体金试纸条的报道。

本发明的实验证明，本发明用样品垫、偶联垫、检测线和质控线标记的ＮＣ膜、吸收垫按照以下工艺组装在支持板上，其中偶联垫上灌注有H7金标单克隆抗体，检测线和质控线由H7多克隆抗体和兔抗鼠lgG喷膜构成。本发明的试纸条具有以下优点：操作操作简单，特异性好、敏感性高、诊断结果可靠；适用于H7亚型禽流感病毒感染的现场检测，尤其适用基层单位或个人的现场快速检测。