生物、医药和医疗器械技术

基于夹心免疫反应，构建一种用于检测H7亚型禽流感病毒的电化学免疫传感器。该传感器检测限低至 1.6 pg/mL，所建立的传感器仅对H7亚型禽流感病毒的检测为阳性，对其它亚型禽流感病毒(H1,H2,H3,H4,H5,H6,H8,H9,H10,H11,H12,H13,H14,H15和H16)、传染性喉气管炎病毒、传染性支气管炎病毒和新城疫病毒病毒的检测结果为阴性。

H7亚型禽流感(AIV H7)不仅严重地影响养禽业的发展，而且危害人类的健康。因此，建立一种快速、灵敏、特异的检测H7亚型禽流感病毒的方法对于防控H7亚型禽流感传播具有重要的意义。目前，用于检测AIV的方法有病毒分离鉴定、酶联免疫吸附(ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、核酸序列扩增(NASBA)以及环介导等温扩增(LAMP)。其中，病毒分离鉴定最为准确，但操作繁杂、耗时较长。ELISA、RT-PCR、NASBA、LAMP等方法能够检测出各种样品中的H7亚型禽流感病毒，但在实际应用中均存在一定的缺陷，因此研究工作者们致力于开发更为出色的新型检测方法和试剂。

近年来，生物传感器由于具有操作简便、灵敏、快速、所需样品少等优点，在病原微生物快速检测中的应用日益受到各国学者的重视。电化学免疫传感器将电化学分析和免疫分析方法相结合，既具备电化学分析特有的检测快速、操作简单、灵敏度高、仪器可微型化等优点，也具有免疫反应中特有的抗原-抗体特异性结合的特点。如今，电化学免疫传感器已经成功应用于环境分析、食品工业和临床医学。

针对目前H7亚型禽流感病毒检测存在的不足，发明人构建了检测H7亚型禽流感病毒的电化学免疫传感器，该传感器的工作电极用甲壳胺包裹石墨烯，还原HAuCl4得到石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子纳米复合物用于修饰金电极固定H7亚型禽流感病毒单克隆抗体。本发明的电化学免疫传感器利用抗体和不同浓度的抗原反应，改变电极界面的电子传导能力 引起响应电流值的变化，从而可实现对抗原定量分析检测的目的。实验显示，本发明对目标病毒H7的检测敏感度为102.3EID50/mL，对非目标禽病原体，如H5和H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒（NDV）、鸡白痢沙门氏菌（SP）、喉气管炎病毒（LTV）和传染性支气管炎病毒（IBV）等检测时其特征吸收峰没有发生改变，表明该传感器具有很高的敏感性和特异性，在病原微生物快速检测领域具有良好的应用前景。